ความรู้ด้านจุลินทรีย์ที่คุณต้องการ

Oct 14, 2022 ฝากข้อความ

จุลินทรีย์เป็นกลุ่มของสิ่งมีชีวิตขนาดเล็กที่มีอยู่ทั่วไปในธรรมชาติและมองไม่เห็นด้วยตาเปล่า และต้องขยายเป็นร้อยเป็นพันหรือหลายหมื่นเท่าด้วยความช่วยเหลือของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงหรือกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน พวกมันมีข้อได้เปรียบที่ขนาดที่เล็ก โครงสร้างที่เรียบง่าย ขยายพันธุ์ได้รวดเร็ว เปลี่ยนแปลงได้ง่าย และมีความสามารถที่แข็งแกร่งในการปรับตัวให้เข้ากับสภาพแวดล้อม

การจำแนกประเภทของจุลินทรีย์:

จุลินทรีย์มีหลายชนิด อย่างน้อยมากกว่า 100,{1}} ชนิด ตามโครงสร้าง องค์ประกอบทางเคมี และพฤติกรรมการดำรงชีวิต และความแตกต่างอื่น ๆ สามารถแบ่งออกเป็นสามประเภท

นิวเคลียสของเซลล์จุลินทรีย์ยูคาริโอตมีความแตกต่างในระดับที่สูงขึ้น รวมถึงเยื่อหุ้มนิวเคลียส นิวเคลียส และโครโมโซม ไซโตพลาสซึมมีออร์แกเนลล์ที่สมบูรณ์ (เช่น เอนโดพลาสมิกเรติคูลัม ไรโบโซม และไมโทคอนเดรีย เป็นต้น) เชื้อราอยู่ในจุลินทรีย์ประเภทนี้

เซลล์จุลินทรีย์โพรคาริโอตมีความแตกต่างทางนิวเคลียร์ในระดับต่ำ มีเพียงนิวคลีโอพลาสซึมดั้งเดิมเท่านั้น ไม่มีเยื่อหุ้มนิวเคลียสและนิวเคลียส ออร์แกเนลล์ยังไม่สมบูรณ์มากนัก จุลินทรีย์ดังกล่าวมีหลายชนิด ได้แก่ แบคทีเรีย สไปโรเชต ไมโคพลาสมา ริคเก็ตเซีย หนองในเทียม และแอกติโนมัยสีท

จุลินทรีย์ที่ไม่มีเซลล์ไม่มีโครงสร้างเซลล์ทั่วไปและไม่มีระบบเอนไซม์เพื่อสร้างพลังงาน และสามารถเติบโตและสืบพันธุ์ได้ในเซลล์ที่มีชีวิตเท่านั้น ไวรัสเป็นของจุลินทรีย์ประเภทนี้

_20221014164932

การแยกและทำให้จุลินทรีย์บริสุทธิ์

การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่มีมากกว่าหนึ่งชนิดเรียกว่าการเพาะเลี้ยงแบบผสม ถ้าเซลล์ทั้งหมดในโคโลนีได้มาจากเซลล์พ่อแม่เซลล์เดียว โคโลนีนั้นเรียกว่าวัฒนธรรมบริสุทธิ์ ในการระบุชนิดของแบคทีเรียนั้น จุลินทรีย์ที่ใช้โดยทั่วไปจะต้องเป็นเชื้อบริสุทธิ์ กระบวนการเพื่อให้ได้มาซึ่งวัฒนธรรมบริสุทธิ์เรียกว่าการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ และมีหลายวิธี

1. วิธีเทจาน

ขั้นแรก ให้เจือจางสารแขวนลอยของจุลินทรีย์เป็นชุด และผสมสารเจือจางจำนวนหนึ่งกับอาหารเลี้ยงเชื้อที่ละลายน้ำได้ที่ระดับ 40-50 องศา แล้วจึงเทส่วนผสมลงในจานเพาะเชื้อที่ปลอดเชื้อ หลังจากแข็งตัวแล้ว จานจะถูกบ่มกลับด้านในห้องคงที่ เซลล์เดียวจะเพิ่มจำนวนขึ้นเพื่อสร้างโคโลนี เซลล์เดียวจะถูกนำมาใช้เพื่อสร้างสารแขวนลอย และขั้นตอนข้างต้นจะถูกทำซ้ำหลายครั้งเพื่อให้ได้วัฒนธรรมที่บริสุทธิ์

2. วิธีเคลือบแผ่นเรียบ

ขั้นแรก ให้เจือจางสารแขวนลอยของจุลินทรีย์อย่างเหมาะสม และวางสารเจือจางจำนวนหนึ่งบนแผ่นวุ้นของสารอาหารที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วซึ่งแข็งตัว จากนั้นให้กระจายสารเจือจางอย่างสม่ำเสมอบนพื้นผิวของอาหารเลี้ยงเชื้อด้วยไม้พายแก้วที่ปราศจากเชื้อ สามารถรับโคโลนีเดี่ยวได้จากการบ่มที่อุณหภูมิคงที่

3. วิธีการเขียนเพลท

วิธีที่ง่ายที่สุดในการแยกเชื้อจุลินทรีย์คือริ้ว ริ้ววัฒนธรรมจำนวนเล็กน้อยบนจานโดยใช้ห่วงที่ปราศจากเชื้อ มีหลายวิธีในการขีดเขียน วิธีการเขียนทั่วไปที่มีแนวโน้มที่จะปรากฏเป็นโคโลนีเดียวคือวิธีสแลช วิธีเส้นโค้ง วิธีกำลังสอง วิธีแผ่รังสี และวิธีสี่ตาราง เมื่อวงเพาะเชื้อเคลื่อนไปข้างหลังบนพื้นผิวของอาหารเลี้ยงเชื้อ ของเหลวของแบคทีเรียบนวงเพาะเชื้อจะค่อยๆ เจือจางลง และในที่สุดเซลล์เดียวจะกระจัดกระจายไปตามเส้นที่วาด หลังจากการเพาะเลี้ยง แต่ละเซลล์จะเติบโตเป็นโคโลนี

4. วิธีการเพาะเลี้ยงเสริมคุณค่า

วิธีการและหลักการของวิธีการเพาะเลี้ยงเสริมคุณค่านั้นง่ายมาก เราสามารถสร้างเงื่อนไขที่อนุญาตให้จุลินทรีย์ที่ต้องการเติบโตเท่านั้น และภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ จุลินทรีย์ที่ต้องการสามารถแข่งขันกับจุลินทรีย์อื่นได้อย่างมีประสิทธิภาพ และเหนือกว่าจุลินทรีย์อื่นในแง่ของความสามารถในการเติบโต หากจำเป็นต้องแยกปรสิตบางตัวออก ตัวอย่างจะต้องได้รับการฉีดวัคซีนเข้าไปในประชากรเซลล์โฮสต์ที่ไวต่อการเจริญเติบโตที่สอดคล้องกันเพื่อเพิ่มจำนวนจำนวนมาก แบคทีเรียปรสิตบริสุทธิ์สามารถรับได้โดยการเพาะซ้ำ

5. วิธีไร้อากาศ

ในห้องปฏิบัติการ เพื่อแยกแบคทีเรียที่ไม่ใช้ออกซิเจนบางชนิด สามารถใช้หลอดทดลองที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อดั้งเดิมเป็นภาชนะเพาะเลี้ยง และหลอดทดลองสามารถอุ่นในอ่างน้ำเดือดเป็นเวลาหลายนาทีเพื่อไล่ออกซิเจนที่ละลายอยู่ในอาหารเลี้ยงเชื้อ . จากนั้นจะถูกทำให้เย็นลงอย่างรวดเร็วและฉีดวัคซีน หลังจากการฉีดวัคซีน พาราฟินปลอดเชื้อถูกเติมลงบนพื้นผิวของตัวกลางเพื่อแยกตัวกลางออกจากอากาศ อีกวิธีหนึ่งคือเปลี่ยนก๊าซในตัวกลางด้วย N2 หรือ CO2 หลังจากการฉีดวัคซีน จากนั้นปิดผนึกปากหลอดทดลองเหนือเปลวไฟ ในบางครั้ง เพื่อแยกแบคทีเรียที่ไม่ใช้ออกซิเจนบางชนิดได้อย่างมีประสิทธิภาพมากขึ้น ตัวอย่างที่แยกได้สามารถฉีดวัคซีนบนอาหารเลี้ยงเชื้อ จากนั้นจึงวางจานเพาะเชื้อลงในอุปกรณ์เพาะเชื้อแบบไม่ใช้ออกซิเจนที่ปิดสนิท

6. วิธีการแยกเซลล์เดียว (หรือสปอร์เดี่ยว)

เป็นการใช้วิธีการแยกไมโครเพื่อแยกเซลล์เดี่ยวหรือบุคคลเดียวโดยตรงจากประชากรผสมเพื่อเพาะเลี้ยงเพื่อให้ได้วัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ สำหรับจุลินทรีย์ขนาดใหญ่ สามารถสกัดแยกทีละตัวโดยใช้เส้นเลือดฝอย สำหรับจุลินทรีย์ที่มีขนาดค่อนข้างเล็ก จำเป็นต้องใช้เครื่องควบคุมขนาดเล็กเพื่อเลือกเซลล์หรือสปอร์ของจุลินทรีย์เดี่ยวด้วยเข็มฝอยหรือเข็มขนาดเล็ก ขอเกี่ยว ห่วง ฯลฯ ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เพื่อให้ได้มาซึ่งเชื้อบริสุทธิ์ วิธีการแยกเซลล์เดียวมีความต้องการเทคโนโลยีการทำงานที่ค่อนข้างสูง

การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์

1. ขึ้นอยู่กับว่าต้องการออกซิเจนในระหว่างการเพาะเลี้ยงหรือไม่ สามารถแบ่งออกได้เป็น 2 ประเภท ได้แก่ การเพาะเลี้ยงแบบใช้ออกซิเจนและการเพาะเลี้ยงแบบไม่ใช้ออกซิเจน

วัฒนธรรมแอโรบิก: เรียกอีกอย่างว่า "วัฒนธรรมแอโรบิก" กล่าวคือเมื่อเพาะจุลินทรีย์นี้ต้องเติมออกซิเจนเข้าไปด้วยไม่เช่นนั้นจะเติบโตได้ไม่ดี ในห้องปฏิบัติการ การเพาะเลี้ยงแบบเอียงทำได้โดยการรับอากาศปลอดเชื้อจากภายนอกผ่านปลั๊กฝ้าย การเพาะเลี้ยงของเหลวส่วนใหญ่ในขวด Erlenmeyer จะถูกเขย่าด้วยเครื่องปั่น เพื่อให้อากาศภายนอกสามารถเข้าสู่ขวดได้อย่างต่อเนื่อง

วัฒนธรรมแบบไม่ใช้ออกซิเจน: หรือที่เรียกว่า "วัฒนธรรมแบบไม่ใช้ออกซิเจน" จุลินทรีย์ดังกล่าวไม่ต้องการออกซิเจนในการเข้าร่วมในการเพาะปลูก ในกระบวนการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจน จุดสำคัญที่สุดคือการกำจัดออกซิเจนในตัวกลาง

2. ตามสถานะทางกายภาพของตัวกลางสามารถแบ่งออกได้เป็น 2 ประเภทคือวัฒนธรรมที่เป็นของแข็งและการเพาะเลี้ยงของเหลว

การเพาะเลี้ยงแบบแข็ง: เป็นวิธีการเพาะเชื้อสายพันธุ์ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่หลวมและอุดมด้วยสารอาหาร และเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ภายใต้สภาวะที่เหมาะสม

การเพาะเลี้ยงของเหลว: ในการทดลอง การเพาะเลี้ยงของเหลวสามารถทำให้จุลินทรีย์เพิ่มจำนวนอย่างรวดเร็วและได้เชื้อจำนวนมาก ภายใต้เงื่อนไขบางประการ ยังเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพสำหรับจุลินทรีย์ในการคัดเลือกและเสริมสร้างแบคทีเรีย