ELISA กับผลลัพธ์ที่ไม่ดี?ติดตามเราเพื่อเลือกจาน Elisa ที่ถูกต้อง
การเลือกเพลท ELISA ที่เหมาะสมเป็นก้าวแรกสู่การทดลอง ELISA ที่ประสบความสำเร็จ แต่หลายคนมองข้ามสิ่งนี้ เมื่อผู้คนทำการทดลอง พวกเขามักจะพิจารณาเฉพาะการทดลองเท่านั้น แต่ไม่ทราบว่าผลิตภัณฑ์มักมีผลกระทบอย่างมากต่อการทดสอบ การเลือกผลิตภัณฑ์อย่างเหมาะสมจะส่งผลต่อความสำเร็จของการทดสอบ เรามักจะพิจารณาปัจจัยต่อไปนี้เมื่อทำการทดลอง ELISA:
1.รูปร่างก้น
ในปัจจุบัน ผู้ผลิตออกแบบหลุมที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์เป็นคอลัมน์อิสระ และเพิ่มระยะห่างระหว่างหลุมอย่างเหมาะสมเพื่อให้สามารถแยกออกจากกันได้ ดังนั้นจึงช่วยลดการปนเปื้อนข้าม แผ่น Elisa ประเภทต่างๆ มีรูปร่างที่แตกต่างกันของก้นหลุม ต่อไปนี้คือรูปร่างก้นรูทั่วไปบางส่วน:
ก้นแบน: ด้านล่างเป็นแนวนอนหรือที่เรียกว่า F ด้านล่าง แสงจะไม่เบี่ยงเบนจากด้านล่าง ซึ่งสามารถส่องผ่านแสงได้มากที่สุด ใช้สำหรับการทดลองที่ต้องใช้ก้นกลมเพื่อให้มองเห็นได้หรือด้วยเหตุผลอื่นๆ
Round Bottom: หรือที่เรียกว่า U-bottom ให้ผลลัพธ์การทำความสะอาดที่ดีที่สุดและประสิทธิภาพไฮบริด เหมาะสำหรับการใช้งานที่ต้องการทดสอบตะกอน
C-bottom: สามารถให้ผลการทำความสะอาดที่ดีระหว่างก้นแบนและก้นกลม ในขณะที่รวมข้อดีของก้นแบน
Cone Bottom: หรือที่รู้จักในชื่อ V-bottom เหมาะสำหรับการสุ่มตัวอย่างและการจัดเก็บตัวอย่างขนาดเล็กอย่างแม่นยำเพื่อการคืนสภาพที่ดีที่สุดสำหรับปริมาตรขนาดเล็ก
2. สีของจานเอลิซ่า
จาน Elisa มีสามสี: โปร่งใส, สีดำและสีขาว
ELISA ส่วนใหญ่เลือกใช้แผ่นใสเป็นวัสดุทดลอง โดยทั่วไปแล้วเพลต Elisa สีขาวและสีดำใช้สำหรับการตรวจจับการเรืองแสง เพลต ELISA สีดำเองดูดซับแสง ดังนั้นสัญญาณจึงอ่อนกว่าเพลต ELISA สีขาว โดยทั่วไปแล้วเพลต Elisa สีดำจะใช้ในการตรวจจับแสงที่แรงกว่า เช่น การตรวจจับการเรืองแสง ในทางตรงกันข้าม แผ่น Elisa สีขาวสามารถใช้สำหรับการตรวจจับแสงที่อ่อนแอกว่า และมักใช้สำหรับเคมีลูมิเนสเซนซ์ทั่วไปและการพัฒนาสีของพื้นผิว (เช่น ลูซิเฟอเรสคู่) การวิเคราะห์ยีนของนักข่าว)
3. วัสดุของจานเอลิซ่า
วัสดุทั่วไป ได้แก่ โพลิเอทิลีน (PE) โพลิโพรพิลีน (PP) โพลิสไตรีน (PS) โพลีไวนิลคลอไรด์ (PVC) และโพลีคาร์บอเนต (PC)
วัสดุที่ใช้กันอย่างแพร่หลายใน ELSIA คือพอลิสไตรีนและโพลีไวนิลคลอไรด์ แผ่นโพลีไวนิลคลอไรด์แผ่นบางสามารถตัดได้และราคาต่ำ ข้อเสียคือผิวเคลือบไม่ดีเท่าแผ่นโพลีสไตรีน และก้นรูไม่แบนเท่าพอลิสไตรีน แต่ค่าพื้นหลังที่สอดคล้องกันก็จะเพิ่มขึ้นเช่นกัน โดยปกติ การบำบัดด้วยการปลูกถ่ายด้วยไอออนจะดำเนินการบนพื้นผิวของเพลต ELISA และกลุ่มการทำงานที่ทำงานอยู่ เช่น หมู่อัลดีไฮด์ หมู่อะมิโน และกลุ่มอีพอกซี จะถูกนำเข้าสู่พื้นผิวโพลีเมอร์เพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพของพื้นผิวพื้นผิว
4. กลไกการผูกมัดที่แตกต่างกัน
การผูกวัสดุเคลือบกับพื้นผิวด้านล่างของเพลทอย่างมีประสิทธิภาพเป็นขั้นตอนที่สำคัญใน ELISA ดังนั้นควรวิเคราะห์ลักษณะโครงสร้างและคุณสมบัติทางเคมีของสารที่จะเคลือบอย่างรอบคอบก่อนการทดลองเพื่อเลือกเพลต Elisa ที่เหมาะสม โดยทั่วไป มีหลายวิธีในการผูกวัสดุเคลือบกับด้านล่างของเพลต: การดูดซับแบบพาสซีฟ การจับโควาเลนต์ และการจับสัมพรรคภาพ
การดูดซับแบบพาสซีฟ: กลไกของการดูดซับแบบพาสซีฟนั้นซับซ้อน และการยึดเกาะระหว่างวัสดุเคลือบกับด้านล่างของเพลตนั้นอาศัยแรงระหว่างโมเลกุล (แรงแวนเดอร์วาลส์) และพันธะไฮโดรเจนเป็นหลัก ใน ELISA ส่วนใหญ่ การยึดเกาะของสารเคลือบกับด้านล่างของเพลตทำได้โดยการดูดซับแบบพาสซีฟ โดยทั่วไป การจับระหว่างแอนติเจนน้ำหนักโมเลกุลขนาดกลางและขนาดใหญ่ (หรือแอนติบอดี) กับด้านล่างของเพลตทำได้โดยการดูดซับแบบพาสซีฟ คุณลักษณะที่ไม่ชอบน้ำ/ชอบน้ำของพื้นผิวด้านล่างของเพลตมักถูกพิจารณาเมื่อเลือกเพลต Elisa ตารางต่อไปนี้แสดงขอบเขตการใช้งานและการใช้พื้นผิวที่ชอบน้ำที่แตกต่างกัน:
ชอบน้ำ | การเชื่อมโยงลำดับความสำคัญ | การใช้งานหลัก |
- | โมเลกุลที่มีบริเวณไม่ชอบน้ำที่สำคัญ เช่น ลิปิด ไลโปโปรตีน โปรตีนขนาดใหญ่ | แอนติเจน ELISA, FL, LIA |
บวก | ชีวโมเลกุลที่มีคุณสมบัติชอบน้ำ/ไม่ชอบน้ำ เช่น โปรตีนขนาดกลางถึงขนาดใหญ่ อิมมูโนโกลบูลิน อัลบูมิน | แซนด์วิชแอนติบอดีคู่ ELISA, Antigen ELISA |
บวก บวก | ชีวโมเลกุลที่มีคุณสมบัติชอบน้ำ/ไม่ชอบน้ำ เช่น โปรตีนขนาดเล็กถึงขนาดใหญ่ อิมมูโนโกลบูลิน อัลบูมิน LPS โปรตีนฟอสโฟรีเลต ไกลโคโปรตีน | แอนติบอดีคู่ ELISA, FIA, LIA |
พลัส พลัส พลัส | ไกลโคโปรตีน โมเลกุลไขมันขั้ว ฟอสโฟลิปิด คาร์ดิโอลิปิด | แอนติเจน ELISA |
การจับตามความสัมพันธ์: การจับตามกลุ่มความสนใจขึ้นอยู่กับการจับเฉพาะของโมเลกุลขนาดใหญ่ที่ติดฉลากกับตัวรับที่สอดคล้องกัน โมเลกุลขนาดใหญ่ที่ติดแท็กสามารถหาได้จากการมีเพศสัมพันธ์ทางเคมีหรือโดยพันธุวิศวกรรม
คุณสมบัติของ Affinity Capture คือ:
1.ความจำเพาะสูง
2.สามารถปรับปรุงอัตราส่วนสัญญาณต่อสัญญาณรบกวนของผลการวัดได้
พื้นผิวก้นหลุมที่พบได้บ่อยคือ: พื้นผิวเคลือบสเตรปทาวิดิน (สเตรปตาวิดิน); ผิวเคลือบนิเกิลคีเลต (Nickel Chelate) และผิวเคลือบกลูตาไธโอน (Glutathione, GSH)
3. พื้นผิวสเตรปทาวิดิน: มีความสัมพันธ์และความจำเพาะสูงของสเตรปทาวิดินและไบโอตินเพื่อให้เกิดการยึดเกาะของแผ่นด้านล่างกับโปรตีนที่เคลือบ
4. พื้นผิวนิกเกิลคีเลต: นิกเกิลคีเลตถูกยึดติดกับพื้นผิวพอลิเมอร์เพื่อจับฟิวชันโปรตีนด้วยแท็ก His (ฮิสทิดีน)
5. พื้นผิวกลูตาไธโอน: การใช้เอนไซม์และความจำเพาะของสารตั้งต้นระหว่างกลูตาไธโอนและกลูตาไธโอน ซัลไฮดริลทรานสเฟอเรส (GST) เพื่อให้เกิดการยึดเกาะของแผ่นด้านล่างกับโปรตีนเคลือบ
ทำไมต้องเลือกจาน BKMAM Elisa?
ผลิตจากวัสดุโพลีสไตรีน 100 เปอร์เซ็นต์
เหมาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบยึดติด,
ฐานแบน ความหนาสม่ำเสมอ และขนาดสม่ำเสมอสำหรับเสาปฏิกิริยา
ปลอดเชื้อด้วยแพ็คเกจส่วนบุคคล
คุณภาพสูงด้วยราคาโรงงาน
